Determinación del efecto de las fosfodiesterasas PDEI y PDER sobre la expresión de genes de virulencia y la formación de biopelícula en Escherichia Coli Enteropatógena

Abstract

Escherichia coli enteropatógena (EPEC) es un agente que causa diarrea aguda, especialmente en niños menores de dos años en países en desarrollo, empleando un sistema llamado A/E (Adherencia y Esfacelación) que afecta la estructura intestinal. Esta investigación, se centró en entender cómo las fosfodiesterasas PdeI y PdeR influyen en la formación de biopelículas y la expresión de genes de virulencia en EPEC. Al comprender estos aspectos a nivel molecular, buscamos identificar estrategias para reducir el impacto de EPEC en la salud infantil. Por esta razón se construyó un plásmido recombinante con los genes bajo estudio, en donde, a partir de su sobreexpresión, se realizó ensayos de biopelícula mediante espectrofotometría, Western blot y se evaluó el perfil de proteínas secretadas mediante electroforésis vertical en geles de poliacrilamida, así como también fusiones reporteras a cat. Entre los resultados más importantes en esta investigación se destaca la producción y secreción de factores de virulencia en los fondos mutantes PerC y pEAF, los cuales carecen del gen perC, y el plásmido de virulencia EAF. El gen perC está codificado en el plásmido de virulencia de EPEC y actúa como un regulador positivo de la isla de patogenicidad LEE. Esto sugiere que las fosfodiesterasas en estudio podrían estar activando la isla de patogenicidad de alguna manera. Se observó actividad de las fusiones reporteras de los genes de virulencia a cat en el medio LB y DMEM, que representan condiciones de represión e inducción. Este hallazgo sugiere su posible implicación en la virulencia de EPEC.