Determinación del efecto de la digualinato ciclasa dgci y la fosfodiesterasa pdec sobre la expresión de genes de virulencia y formacion de biopelícula en escherichia coli enteropatogena

Abstract

Escherichia coli enteropatógena (EPEC), es un organismo capaz de causar diarrea aguda, fiebre y vómito en niños menores de dos años procedentes de diferentes países en desarrollo, esto provoca índices de mortalidad y morbilidad elevados. Por esta razón es importante analizar y comprender el sistema de regulación génica implicado en la virulencia de EPEC. También es importante estudiar los genes implicados en la síntesis de proteínas relacionadas con la expresión de factores de virulencia y la formación de biopelículas. Por esta razón se determinó el efecto de la diguanilato ciclasa (DgcI) y la fosfodiesterasa (PdeC) sobre la expresión de genes de virulencia y la formación de biopelícula en E. coli enteropatógena. En esta investigación se estudió el efecto de la sobreexpresión de dgcI y pdeC en la formación de biopelícula en medio LB a diferente tiempo y temperatura. A demás, se evaluó la expresión de factores de virulencia mediante ensayos de Western blot y perfil de proteínas secretadas. Los resultados demostraron que existe una influencia de los genes sobreexpresados al ser evaluados en los fondos mutantes ¿perC y pEAF, debido a que se observó cambios en la producción de proteínas involucradas en el sistema de secreción tipo 3 ubicado en la isla de patogenicidad LEE. Finalmente, se evaluó el comportamiento de las cepas mutantes con fusión al gen reportero cat, mediante el cual se comprobó que existe un fenotipo diferente al comparar las bacterias recombinantes contra su control. Con los datos obtenidos se corroboró que los genes bajo estudio están involucrados en la virulencia de EPEC.